به گزارش حکیم مهر به نقل از ایسنا، یکی از مشکلات در صنعت دامپزشکی تفکیک طیور آلوده از واکسینه است و بر این اساس تست‌هایی را تحت عنوان DIVA طراحی می‌کنند تا بتوان حیوان یا طیور آلوده را از واکسینه تفکیک کنند و کیت طراحی شده این توانایی را دارد.
در این کار برای تشخیص آنفلوآنزای پرندگان از پپتید ایمونودومیننت پروتئین NS1 ویروس آنفلوآنزا جهت تشخیص استفاده شد. این پپتید به علت سایز کوچکی که دارد در تست وسترن بلات قابل استفاده نیست. زیرا با اعمال ولتاژ این پپتید دیفیوز می‌شود. در این تحقیق با استفاده از فناوری نانو از نانوذرات طلا استفاده شد تا پپتید در سطح کاغذ مخصوص تست وسترن بلات نگه داشته شود.
نانوذرات طلا با گروه‌های عاملی اسیدهای آمینه موجود در پپتید باند می‌شوند و مانع از دیفیوز شدن آن حین عمل وسترن بلات می‌گردند و بدین ترتیب در مراحل بعد می‌توان سرم‌های مشکوک را با این آنتی ژن ارزیابی نمود و آلودگی را تشخیص داد.
تارا امامی دانشجوی دکتری فناوری نانو پزشکی دانشگاه تهران، که پایان نامه کارشناسی ارشد خود را در این زمینه انجام داده است در مورد نحوه انجام این تحقیقات گفت: «ابتدا نمونه‌های سرمی آلوده و واکسینه طیور جمع آوری شد و پپتید مورد نظر به‌وسیله‌ی شرکت آلمانی سنتز شد. نانوذراتی که استفاده شد هم به‌صورت تجاری و هم در آزمایشگاه جهت مقایسه خریداری و سنتز شدند.
وی افزود: ابتدا با تکنیک Tricine SDS PAGE پپتید روی ژل برده شد پپتید به علت سایز کوچکی که دارد در شرایط خاص باید الکتروفورز شود سپس کاغذهای PVDF که برای وسترن بلات به‌کار می‌روند با نانوذرات طلا آغشته شد و سپس پپتید از روی ژل به کاغذ منتقل شد، در مرحله بعد سرم‌ها با این کاغذها که حاوی آنتی ژن پپتید هستند انکوبه شدند و آنتی بادی موجود در سرم با آنتی ژن واکنش داده و با هم باند می‌شوند.
وی گفت: پس از اضافه کردن آنتی بادی ثانویه حاوی آنزیم پراکسیداز، این آنتی بادی در صورت اتصال آنتی بادی اولیه با آن واکنش داده و در مرحله آخر با اضافه نمودن سوبسترای کمی لومینسانس در دستگاه Gel Doc باند حاصل از واکنش را مشاهده می‌کنیم.»
این محقق خاطرنشان کرد: نتایج این طرح در دامپزشکی، جهت تشخیص بیماری و تفکیک طیورآلوده به ویروس آنفلوآنزا از طیور واکسینه شده کاربرد دارد.
به گزارش ایسنا مقاله این کار تحقیقاتی که توسط تارا امامی و همکاران وی به نگارش درآمده، در مجله the journal of applied poultry research (جلد 21، شماره 3، سپتامبر 2012) منتشر شده است.
